塞内加谷病毒3C蛋白生物信息学分析及真核质粒构建表达

摘要：

3C蛋白是塞内加谷病毒重要的非结构蛋白之一,在病毒入侵机制及影响宿主抗病毒天然免疫方面发挥重要作用.试验应用Oligo 7.0和Primer 6.0软件,用BLAST对比SVV世界参考株,设计一对特异性引物.以SVV-SN株病毒液抽提RNA为模板,将序列连接pMD 19-T载体后测序,对正确片段作生物信息学分析可知SVV 3C可编码一个较稳定非分泌型蛋白,具有一个保守“催化三联体”.预测发现该蛋白具有16个磷酸化位点,证明其较高活性,预测其二级结构后得到再次证实.将pMD19-SVV-3C和真核表达载体pcDNA3.1(+)双酶切后连接,重组质粒经鉴定后命名为pcDNA3.1 (+)-SVV-3C.将pcDNA3.1(+)-SVV-3C转染到BHK-21细胞24 h后制样作Westernblotting,成功验证该重组质粒可在BHK-21中真核表达.相比其他同科病毒,当前SVV 3C蛋白研究存在空白.文章旨在为进一步研究SVV 3C蛋白结构提供理论依据,为后续探索SVV 3C蛋白对于宿主作用机制奠定基础.

关键词：塞内加谷病毒、3C蛋白、生物信息学分析、真核表达

所属期刊栏目：50

分类号：Q344+.13(遗传学分支学科)

资助基金：四川省“十三五”育种攻关项目2016NYZ0052;国家“十二五”科技支撑计划项目2015BAD12B04-2.3;国家农业产业技术体系四川兽药创新团队专项

在线出版日期：2019-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：32-39