牛mettl3基因的原核表达与蛋白纯化
m6A甲基转移酶(methyltransferase-like protein 3,METTL3)可调控mRNA的m6A甲基化水平,调节细胞蛋白质合成,实验室前期发现METTL3为乳腺上皮细胞乳合成重要调节分子,发挥泌乳调节作用.目前尚不清楚METTL3分子结构基础及其参与的调节机制.为揭示METTL3结构与功能关系,对METTL3蛋白作原核表达及纯化.研究采用PCR方法扩增牛mettl3基因完整CDS区,将CDS区插入原核表达载体pGEX-4T-1,异丙基硫代书-D-半乳糖苷(IPTG)诱导METTTL3蛋白大量表达,用8 mol·L-1尿素裂解包涵体,利用GST蛋白纯化试剂盒纯化诱导获得METTL3蛋白.SDS-PAGE证实GST-METTL3融合蛋白存在于包涵体内,试验获得高纯度GST-METTL3融合蛋白,为进一步研究METTL3蛋白在奶牛泌乳中作用提供重要依据.
牛、METTL3、原核表达、纯化
48
Q786(基因工程（遗传工程）)
国家高技术研究发展计划863计划项目2013AA102504-03
2017-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
1-7
