牛eIF5基因原核表达与蛋白纯化

摘要：

研究应用PCR方法扩增牛eIF5基因编码序列，通过Eco R Ⅰ和Sal Ⅰ酶切位点将其定向插入pGEX-4T-1载体，构建原核表达重组质粒pGEX-4T-1-eIF5，并转化大肠埃希菌BL21。酶切和测序鉴定正确后，用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）大量诱导表达，利用GST-Sepharose 4B亲和珠纯化，SDS-PAGE和Western Blot鉴定。结果表明，原核表达载体pGEX-4T-1-eIF5构建成功，Western Blot证实融合蛋白大量表达，纯化后获得GST-eIF5融合蛋白，为深入研究牛eIF5蛋白功能奠定基础。

关键词：牛、eIF5、克隆、原核表达、纯化

所属期刊栏目：47

分类号：S823;Q785(家畜)

资助基金：国家高技术研究发展计划863项目2013AA102504-03

在线出版日期：2016-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：68-73