10.3969/j.issn.1005-9369.2015.02.002
猪轮状病毒VP7蛋白模拟表位的噬菌体展示技术筛选与鉴定
猪轮状病毒(PoRV)是引起仔猪腹泻的重要病原之一,其主要结构蛋白衣壳蛋白VP7可诱导机体产生中和抗体。文章以制备的抗PoRV VP7单克隆抗体(MAb)3B6作为靶分子,利用噬菌体十二肽库展示技术对其模拟表位进行筛选。四轮筛选后随机挑取阳性克隆扩增后进行ELISA鉴定,同时提取其基因组DNA测序,10个阳性噬菌体亲和肽拥有共同的外源肽序列“VPLGTDNGDIWV”,而且与靶分子有很高亲和力。阳性噬菌体亲和肽与VP7蛋白进行序列比对,结果表明,十二肽中有4个氨基酸(第167位P、第178位T、第179位D和第184位W)与VP7蛋白167~184位氨基酸有一定的相似性。竞争抑制ELISA证明亲和多肽降低PoRV与抗VP7单克隆抗体之间的作用,病毒竞争抑制试验表明亲和多肽可以竞争性地抑制PoRV感染细胞。因此由这4个氨基酸构成的基序很有可能作为猪轮状病毒VP7蛋白的一个模拟表位。
猪轮状病毒、VP7蛋白、噬菌体筛选、模拟表位
S828;S851(家畜)
国家自然科学基金项目31300758,31340003;“十二五”国家科技支撑项目2013BAD12B04;哈尔滨科学技术局项目RC2012XK002003;教育部重点项目212038
2015-03-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
11-17