猪轮状病毒VP7蛋白模拟表位的噬菌体展示技术筛选与鉴定

摘要：

猪轮状病毒（PoRV）是引起仔猪腹泻的重要病原之一，其主要结构蛋白衣壳蛋白VP7可诱导机体产生中和抗体。文章以制备的抗PoRV VP7单克隆抗体（MAb）3B6作为靶分子，利用噬菌体十二肽库展示技术对其模拟表位进行筛选。四轮筛选后随机挑取阳性克隆扩增后进行ELISA鉴定，同时提取其基因组DNA测序，10个阳性噬菌体亲和肽拥有共同的外源肽序列“VPLGTDNGDIWV”，而且与靶分子有很高亲和力。阳性噬菌体亲和肽与VP7蛋白进行序列比对，结果表明，十二肽中有4个氨基酸（第167位P、第178位T、第179位D和第184位W）与VP7蛋白167~184位氨基酸有一定的相似性。竞争抑制ELISA证明亲和多肽降低PoRV与抗VP7单克隆抗体之间的作用，病毒竞争抑制试验表明亲和多肽可以竞争性地抑制PoRV感染细胞。因此由这4个氨基酸构成的基序很有可能作为猪轮状病毒VP7蛋白的一个模拟表位。

关键词：猪轮状病毒、VP7蛋白、噬菌体筛选、模拟表位

分类号：S828;S851(家畜)

资助基金：国家自然科学基金项目31300758,31340003；“十二五”国家科技支撑项目2013BAD12B04；哈尔滨科学技术局项目RC2012XK002003；教育部重点项目212038

在线出版日期：2015-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：11-17