10.3969/j.issn.1005-9369.2015.02.001
双抗体夹心ELISA检测排泄物PEDV
用蔗糖密度梯度离心法纯化猪流行性腹泻病毒(PEDV)免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术获得2株分泌抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)单克隆抗体,建立检测PEDV的双抗体夹心ELISA方法。结果表明,该双抗体夹心ELISA最佳反应条件为,兔抗PEDV抗体稀释度为1??800包被37℃1 h加4℃12 h,样品反应时间为90 min,酶标抗体工作浓度为1??2000作用45 min,以OD490nm≥0.37作为阳性判定标准。该ELISA的重复性变异系数小于10%,最低检测限为5×103.67TCID50/mL,并与猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒无交叉反应。用该ELISA方法和RT-PCR方法检测48份临床粪便样品,结果显示, ELISA阳性检出率为39.6%,而RT-PCR方法检测卡的阳性检出率为43.8%。表明双抗体夹心ELISA方法具有特异性强、灵敏性高和重复性好等优点,可用于PEDV快速检测。
猪流行性腹泻病毒、单克隆抗体、双抗体夹心ELISA、检测
S767.5;X172(森林保护学)
科技部863计划项目2012AA101304-3;黑龙江省高校科技创新基金2011TD001
2015-03-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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