IBV HH06株N基因原核表达及间接ELISA方法的建立

摘要：

鸡传染性支气管炎（Avian infectious bronchitis， IB）是由传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus，IBV）引起的一种急性、高度接触性传染病。试验根据NCBI发表的IBV基因序列设计引物，利用RT-PCR方法扩增病毒的N基因，并将其导入pET-30a（+）载体中，构建原核表达质粒。SDS-PAGE及Western-blot检测结果表明，重组蛋白得到表达并能与IBV阳性血清有很好的反应性。以纯化后的重组蛋白作为包被抗原，在包被量为2.5μg·mL-1、血清1??40倍稀释条件下，建立并优化间接ELISA检测方法。临床样品检测表明，该方法可高效检测出IBV抗体，并与IBV病毒作为包被抗原ELISA检测结果一致，为IB的快速诊断及流行病学研究奠定基础。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒、N基因、原核表达、间接ELISA

分类号：Q786;R526.2+1(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目31172295，31272569

在线出版日期：2014-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：75-82