10.3969/j.issn.1005-9369.2012.06.014
牛Dgat1基因高GC含量片段的定点突变
将扩增出的1.8kb目的片段克隆入pUCm-T载体,以构建好的质粒为模板进行突变反应.Dpn Ⅰ酶切反应产物,去除甲基化及半甲基化DNA模板.酶切产物经纯化后转入DH5α感受态细胞,提取质粒测序.结果表明,双核苷酸碱基AA突变为GC,成功得到突变载体.将定点突变试剂盒方法加以改进,完成GC含量高达69.5%模板定点突变,改进后的方法操作简单、经济实用,有效地解决了高GC含量模板难突变难题.
定点突变、高GC含量、牛Dgat1基因、232位点
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Q343.1+3;Q344+.12(遗传学分支学科)
国家转基因重大专项2008ZX08007-002,2009ZX0800-005B,2011ZX08007-002
2012-10-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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