适合于基因组测序的红麻高纯度线粒体DNA提取

摘要：

采用红麻黄化苗为试材,结合密度梯度离心和差速离心的方法提取线粒体DNA(mtDNA)以满足测序要求.结果表明,蔗糖密度梯度离心法比Percoll密度梯度离心法更适合于红麻线粒体的分离.分离后的线粒体经DNaseI消化核DNA,并采用Jannus绿检测线粒体的完整性,SDS和蛋白酶K裂解线粒体,并用酚/氯仿抽提除去蛋白,乙醇沉淀得到线粒体DNA,再经 RNase A消化去除RNA.提取的mtDNA经1.0%琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计检测,并设计叶绿体和核特异性基因引物检测是否有污染存在.结果表明,此方法提取的mtDNA纯度高,没有污染,满足基因组测序要求.

关键词：红麻、线粒体、mtDNA、测序

所属期刊栏目：42

分类号：S563.5;Q751(经济作物)

资助基金：国家自然科学基金项目30900912,31060199;教育部科学技术研究重点项目209095

在线出版日期：2011-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：98-101