应用PCR方法向基因内部引入序列的策略研究

摘要：

应用PCR方法,利用3条引物与2个模板,分别采用一步PCR、两步PCR、三步PCR扩增策略,向cte基因内部引入一段内含子序列,以达到基因改造的目的.结果表明,利用一步PCR的策略,难以扩增得到目的基因,利用二步PCR的策略,虽然可以得到目的条带,但存在非特异扩增;通过三步PCR的策略,即第一步PCR扩增产物作为第二步扩增反应的引物,进行小循环的单引物扩增,第三步以第二步产物为模板进行双引物扩增的方法,可以高效扩增得到目的条带.说明三步PCR策略为基因改造的理想方法.

关键词：基因改造、内含子、cre基因、PCR

所属期刊栏目：42

分类号：Q81(生物工程学(生物技术))

资助基金：黑龙江省青年基金资助项目QC07C46;东北农业大学博士启动基金

在线出版日期：2011-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：88-93