植物亚细胞定位载体卡盒pCEG的构建及验证

摘要：

GFP基因被广泛地应用于植物转基因以及基因功能验证研究,然而构建与GFP融合的植物表达载体,常会因酶切位点难以选择,而使得载体构建过程复杂,周期长.以含GFP的质粒pCAMBIA-1302为基础,消除此质粒本身的多克隆位点(MCS),并在此质粒GFP基因序列前插入原核表达载pET-32b的多克隆位点,构建了植物GFP亚细胞定位载体卡盒pCEG;采用农杆菌介导的转化方法,将此载体卡盒pCEG导入模式植物烟草叶片中进行瞬时表达,用激光共聚焦显微镜观察GFP蛋白的亚细胞定位情况,发GFP蛋白均匀的在细胞质和细胞核中表达,证明此载体卡盒可用于植物基因的亚细胞定位分析,并为构建目的基因与GFP融合的植物表达载体提供了很多可用的酶切位点,对植物基因功能验证提供了分子操作简便的植物表达载体卡盒,具有重要的利用价值.

关键词：载体卡盒构建、亚细胞定位、GFP、烟草

所属期刊栏目：42

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高科技发展计划863计划2008AA10Z153;国家自然科学基金资助项目30570990;黑龙江省科技厅重大攻关项目GA06B10;黑龙江省教育厅科技项目11521024;黑龙江省教育厅科技项目11521021

在线出版日期：2011-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：83-88