辣椒素生物合成途径基因pal克隆及原核表达分析

摘要：

以辣椒品种"益都红"胎座RNA反转录的cDNA为模板,根据pnl基因保守序列设计引物,PCR扩增得到1条全长2 157 bp的目的片段.该基因包含有完整的开放阅读框架,编码718个氨基酸,预测的分子质量为73 ku.与多种植物PAL的氨基酸序列有一定的同源性,其中与同科同属植物朝天椒的同源性最高.应用分子克隆的方法成功地构建了pET-32a-pal重组表达质粒,优化得到诱导表达的最佳条件为:IPTG 0.3 mmol·L-1,温度28℃,时间6 h,经SDS-PAGE检测6xHis-PAL在E.coli中得到了高效表达,重组蛋白分子质量约为93 ku.因此,该基因的克隆与原核表达为深入研究辣椒PAL的基因结构、生物活性、表达调控机制以及辣椒素的生物合成机制奠定了重要基础.

关键词：辣椒素、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、原核表达

所属期刊栏目：41

分类号：Q785;Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：长春市科技局国际合作计划项目06GH17;黑龙江省留学回国基金LC04C18

在线出版日期：2010-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：66-71