AA肉鸡IFN-γ的表达及蛋白结构的初步预测

摘要：

为了进一步研究肉鸡Ⅱ型干扰素(ChIFN-γ)蛋白的结构与功能,将新城疫Ⅳ系苗接种于9～11日龄SPF鸡胚尿囊腔中,诱生ChJFN-γ,提取脾脏总RNA,经过RT-PCR扩增出ChIFN-γ基因cDNA,测序后亚克隆至原核表达载体pPmEXTMHTb中,转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE及westen Blot检测,利用DNAStar软件包中的Editseq将ChIFN-γ核苷酸序列翻译成氨基酸序列.然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,对蛋白的二级结构进行初步预测,利用自动比较蛋白同源建模的服务器Swiss-M0del对ChIFN-γ的氨基酸序列进行三级结构预测.结果显示,所克隆的ChIFN-γ序列大小为495 bp,与Digby和Lowenthal首次克隆的鸡Ⅱ型干扰素的同源性为99.8%.表达出预期大小(18 ku左右)的融合蛋白,可以与His单克隆抗体发生特异性反应,蛋白质结构预测表明,ChIFN-γ蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,其解螺旋最低能量值为-14 245.698 kJ-mol-1.,有6个α螺旋结构.

关键词：肉鸡、Ⅱ型干扰素、蛋白、表达、蛋白质结构

所属期刊栏目：40

分类号：S54;S823(饲料作物、牧草)

资助基金：国家自然基金项目30671527;黑龙江省博士后基金项目LBH-Z07242;东北农业大学博士基金

在线出版日期：2009-06-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：74-79