HSV1-TK基因原核表达载体的构建及表达检测

摘要：

探讨自杀基因HSV1-TK原核表达情况,为进一步将细菌载体应用于肿瘤基因治疗奠定基础.首先以质粒pHSV-106为模板,通过PcR获得日HSV1-TK基因克隆并将其与原核表达栽体pGEX-6P-1连接,重组质粒经鉴定后将其转化到E COli BL21,观察其蛋白表达情况.结果表明,TK基因全长1 128 bp,与理论值相符.经测序发现插入到载体pGEX-6P-1上的DNA片段与TK基因的同源性为100%;SDS-PAGE可明显看出大小为41 ku的TK酶表达,并随时间的延长表达量不断增加.试验证明来源于单纯疱疹病毒的胸苷激酶能够实现原核表达,这一结果是应用细菌载体携带自杀基因TK治疗肿瘤的前提.

关键词：HSV1-TK基因、原核表达、基因治疗、肿瘤

所属期刊栏目：40

分类号：Q344+.13(遗传学分支学科)

资助基金：东北农业大学博士基金

在线出版日期：2009-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：92-97