减蛋综合征病毒五邻体重组蛋白的原核表达及抗原性鉴定

摘要：

根据减蛋综合征病毒(EDSV)AV-127株的全基因序列(GenBank序列号AC000004)设计了1对引物,采用PCR扩增出五邻体(Penton)完整基因,将其连接到克隆裁体pMD18-T,经过鉴定后测序.序列分析表明,所获得的DNA片段核苷酸序列和GenBank中AV-127株的五邻体比较有9个碱基突变,但利用DNAstar分析,两者的氨基酸完全一致.然后酶切胶回收后将目的片段连接到质粒表达载体pET-30a(+),获得的阳性克隆命名为pET-30a-Penton.将pET-30a-Penton转化E coli Rosetta,经37℃、1.0 mmol·L-1IPTG诱导表达5 h,SDS-PAGE分析超声裂解后的上清和沉淀,结果显示目的蛋白以包涵体形式存在,蛋白分子质量约为54.0 ku.Western Blot试验结果表明目的蛋白具有较好的抗原活性.

关键词：减蛋综合征病毒、五邻体、原核表达、抗原性

所属期刊栏目：40

分类号：S852.65;Q78(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2009-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：83-87