薄皮甜瓜果实ACC合成酶cDNA克隆及反义表达载体的构建

摘要：

从成熟的薄皮甜瓜(Cucumis melo cv.Qitian I)果肉组织中分离总RNA,经RT-PCR扩增得到0.7kb的cDNA片段,将其克隆到质粒载体pGEM-T Easy.测序表明,该基因为777 bp,编码258个氨基酸,与GenBank中甜瓜1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthse,ACS)基因比对,核苷酸同源性为99%,氨基酸同源性为98%.克隆片段经双酶切消化,反向插入到植物表达载体pCAM2301的E8启动子和NOS终止子之间,构建成E8调控下ACS基因反义表达载体.通过冻融法将携带反义cDNA的植物表达载体质粒转入根癌农杆菌LBA4404,得到了完整的Ti质粒表达载体系统.

关键词：薄皮甜瓜、ACC合成酶基因、反义基因、反义表达载体

所属期刊栏目：37

分类号：S652.2;Q785(瓜果园艺)

资助基金：黑龙江省科技攻关项目GB01B402-01

在线出版日期：2006-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：22-27