防御素基因克隆和表达载体构建

摘要：

人防御素(HNP)是一类广谱抗菌阳离子小肽的总称,一般具有3个分子内二硫键.防御素对于细菌、真菌乃至某些被膜病毒有广谱杀伤作用,是免疫系统中的重要组分.实验根据已发表的HNP-1 cDNA序列,设计并合成了一对引物.以HL-60细胞总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增目的片段并克隆到pUC18载体上,经筛选获得阳性重组子pUC18-HNP-1(pDFS1).测序分析证实,扩增片段即为HNP-1cDNA.pDFS1再经SmaI与SalI酶切、插入pGEX-6p-1质粒构建HNP-1表达载体.利用PCR技术和酶切反应筛选转化子最终获得pGEX-6p-1-HNP-1(pDFS2)重组质粒.

关键词：人防御素、RT-PCR、克隆、表达载体

所属期刊栏目：35

分类号：Q939.92;R978.1(微生物学)

在线出版日期：2004-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：422-426