10.3969/j.issn.1005-9369.2001.04.003
大豆农杆菌介导转化系统的优化研究
对大豆子叶节再生系统及其农杆菌介导转化的适宜筛选剂浓度进行了优化;同时以发芽5天的大豆无菌苗的下胚轴切段为外植体,以抗性愈伤为指标,对影响农杆菌介导的大豆转化频率的因子进行了研究.结果表明:不同大豆品种对选择剂的敏感性存在一定差异.4种选择剂比较,PPT抑制效果最好,品种之间比较稳定;潮霉素次之;卡那霉素的有效浓度最高.4种选择剂的适宜浓度分别为:卡那霉素100~200 mg*L-1;G418 50~75 mg*L-1;潮霉素20~30 mg*L-1;PPT 5 mg*L-1.农杆菌感染时间和共培养时间均对大豆的转化有明显的影响.感染时间以8分钟左右为宜;共培养时间以2~4天为宜.在农杆菌感染和共培养阶段的乙酰丁香酮浓度和pH值对大豆转化频率有明显影响.pH值以5.40~5.60为宜;乙酰丁香酮的适宜浓度为100 μmol*L-1左右.在感染农杆菌之前,让外植体在高渗培养基上预培养一段时间能提高大豆下胚轴切段的转化频率.最适预培养天数为1d.
大豆、农杆菌介导、转化、系统优化
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S565.1;S5|01|;S5|035.3|(经济作物)
2004-02-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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