银杏 GbSAD 基因对非生物胁迫的响应及原核表达1）

摘要：

以悬浮培养的银杏愈伤组织为材料，采用荧光定量RT－PCR研究了GbSAD基因在高盐和不同外源激素处理条件下的表达模式。结果表明：外施100μmol· L－1水杨酸（SA）后，GbSAD表达量发生显著变化；外施100μmol· L－1脱落酸（ABA）、40μmol· L－1乙烯利（ETH）、100μmol· L－1茉莉酸甲酯（MeJA），GbSAD表达量未呈现显著变化；外施200 mmol· L－1氯化钠（ NaCl），GbSAD表达量小幅度降低。 GbSAD组织表达分析表明基因在根、茎、叶、雄花和雌花中均有表达，在叶中表达量最高。 SAD氨基酸序列同源比对发现，GbSAD与其他被子植物的序列相似度较高，表明GbSAD在进化上较保守。将银杏GbSAD克隆到原核表达载体pET－32a（＋）中，转化大肠杆菌（Escherichia coli） BL21（DE3）并诱导表达。结果表明，GbSAD蛋白在1 mmol· L－1IPTG的诱导下，培养2 h即能实现融合蛋白的高效表达，为进一步纯化目的蛋白及研究其功能奠定了基础。

关键词：银杏、GbSAD基因、非生物胁迫、原核表达

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2016-03-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

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