茶树类黄酮3′-羟化酶基因的克隆与表达特性分析

摘要：

类黄酮3′-羟化酶(Flavonoid 3′-hydroxylase,F3′H)是细胞色素P450酶家族(Cytochrome P450,CYP450)的单加氧酶,在植物次生代谢和逆境调控方面起着重要的作用.本实验以茶树品种龙井43作为试验材料,利用RT-PCR方法,从cDNA中克隆得到茶树中编码类黄酮3′-羟化酶基因,命名为CsF3′H1.序列分析显示,CsF3′H1基因开放阅读框为1530 bp,编码509个氨基酸,含有相对保守的P450酶系结合域.进化树分析表明,CsF3′H1与CsF3′H3的进化树关系相近,与CsF3′H2的进化树关系较远.序列多重比对显示,CsF3′H1蛋白具有F3′H蛋白的特征基序,并与高粱、猕猴桃、杨树、拟南芥和葡萄同源蛋白一致性为66.48%.氨基酸组分、理化性质、亲水性/疏水性和无序化分析显示,CsF3′H1是亲水性蛋白,无序化特征不明显.利用实时荧光定量PCR对CsF3′H1基因在茶树不同组织和不同激素处理下的表达谱进行检测,结果显示:不同组织中,CsF3′H1基因的表达水平在第一叶中最高,之后随着叶片的成熟逐渐下降,CsF3′H1基因在老叶和根中几乎不表达,表达水平从高到低依次为第一叶>第二叶>第三叶>第四叶>嫩茎>根>老叶;在不同激素处理中,CsF3′H1在SA激素处理下的表达量最高,为对照的2.24倍,在MeJA处理下表达量最低,为对照的0.43倍.

关键词：茶树、类黄酮3′-羟化酶、进化树分析、组织表达、激素处理

所属期刊栏目：37

分类号：S571.1;Q52

资助基金：国家自然科学基金31570691

在线出版日期：2017-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：108-117