基于4300 DNA分析系统的茶树SSR发掘方法优化与建立

摘要：

简单序列重复（Simple sequence repeats, SSR）在茶树遗传与育种研究中具有重要的作用，基于4300 DNA 分析系统的 SSR 发掘具有通量高、准确和灵敏等特点，已被用于许多物种的分子标记研究，但在茶树的相关研究中尚未见报道。本研究应用单因素试验和L9(34)正交设计试验对影响茶树SSR-PCR的主要参数进行优化，建立了适合于4300 DNA 分析系统的茶树 SSR-PCR 反应体系：1.0μL DNA（25 ng·μL-1），0.2μL M13F-F、0.2μL R和0.4μL IR-M13F，0.8μL dNTPs（25 mmol·L-1），1.0μL 10×Buffer（含Mg2+），0.1μL Ex-Taq 聚合酶（5 U·μL-1），无菌水定容至10μL。所有引物浓度均为1μmol·L-1。同时，本研究还证明，可以以自行配制的6.5%聚丙烯酰胺凝胶溶液（acry∶bis=29∶1）替代4300 DNA分析系统指定凝胶溶液，检测SSR位点。

关键词：茶树、4300 DNA分析系统、SSR-PCR

分类号：S571.1

资助基金：国家星火计划重大项目2012GA710001;安徽省科技专项13Z03012

在线出版日期：2014-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：481-488