茶树酯型儿茶素水解酶鉴定及其检测体系的建立

摘要：

本试验利用体外酶学方法,结合薄层层析( TLC)、高效液相色谱(HPLC)和液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析,首次从茶树中检测到活性较高的酯型儿茶素水解酶(Galloylated Catechins Hydrolase,GCH)的存在.在酯型儿茶素水解酶催化下,酯型儿茶素发生水解反应,生成没食子酸(GA)和非酯型儿茶素.试验确立了酯型儿茶素水解酶的最适检测体系,在2.5 mL反应体系中包含0.2 mmol/L酯型儿茶素、2.4 mmol/L抗坏血酸、粗酶提取液若干(含0.1 mg酶蛋白)和0.1 mol/L磷酸缓冲液(pH6.5),在30℃下,反应30 min.此外,试验利用硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析和凝胶过滤层析对该酶进行了初步纯化.

关键词：茶树、酯型儿茶素水解酶、鉴定、检测体系

所属期刊栏目：31

分类号：S571.1;Q946.84+1

资助基金：国家自然科学基金30771755,30972401;安徽省自然科学基金090411006;国家重点基础研究发展计划“973”前期项目2007CB116211

在线出版日期：2012-02-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：439-446