茶树花青素还原酶基因在大肠杆菌中的表达及优化

摘要：

茶树花青素还原酶是催化非酯型儿茶素EC和EGC合成的关键酶.采用RT-PCR技术,获得了茶树花青素还原酶基因的开放阅读框,它编码含337个氨基酸的蛋白质,推测分子量为37 kD,等电点为6.54;成功地将该基因重组到表达载体pET32a(+)上,并在大肠杆菌rosetta中进行原核表达;优化了原核表达中诱导时间、诱导温度、IPTG浓度、氨苄青霉素浓度,纯化出目的蛋白.HPLC检测表明,目的蛋白具有ANR酶活性.

关键词：茶树、花青素还原酶、原核表达、酶活性

所属期刊栏目：31

分类号：S571.1;Q554

资助基金：973计划前期项目2007CB 116211;国家自然科学基金30771755、30972401和31000314;安徽省自然科学基金09041-1006;安徽省教育厅自然科学研究项目KJ2010A1 17

在线出版日期：2011-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：326-332