10.3969/j.issn.1000-369X.2007.01.009
茶氨酸生物合成工程菌构建
通过PCR扩增E.coli DH5α的γ-ggt基因,产物经纯化后用Kpn I和Xho I双酶切,回收γ-谷氨酰转肽酶基因目的片断,并与经相同双酶切的表达载体pET-32a连接,得到重组质粒pET-GGT.将重组质粒转化到E.coli BL21中,获得工程菌.工程菌株经0.05 mol/L IPTG,32℃诱导表达,湿菌体的酶活达到2.0 U/g,大约是出发菌株E.coli DH5α的15倍.工程菌催化L-谷氨酰胺和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的产量达到29.40 g/L,L-Gln的转化率为48.22%,其催化L-谷氨酰胺和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的能力比出发菌株E.coli DH5α提高了100多倍.
γ-谷氨酰转肽酶、茶氨酸、工程菌、构建
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S571.1;Q523
2007-03-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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