内皮祖细胞来源外泌体在体外循环致脑损伤中作用研究

摘要：

目的 探讨内皮祖细胞来源的外泌体在体外循环引起的脑损伤中的作用机制.方法 选取雄性SD大鼠45只,随机分为假手术组、体外循环组与外泌体处理组,每组15只.假手术组大鼠采用气管插管机械通气,仅在右股动脉、右颈内静脉穿刺置管;体外循环组建立无血预充非停跳体外循环术后认知功能障碍模型;外泌体处理组大鼠动物模型同体外循环组,待生命体征稳定后给予无菌状态下尾静脉注射200μl外泌体悬浮液.采用Garcia神经功能评价标准评估大鼠神经功能状况;采用TUNEL染色法检测神经细胞的凋亡;采用酶联免疫吸附法检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血清酸性钙结合蛋白(S-100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平;免疫蛋白印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平;流式细胞术检测辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)百分比含量.结果 与假手术组比较,体外循环组、外泌体处理组各个时间点大鼠的Gar-cia神经功能评分均明显升高,脑细胞凋亡明显,差异均有统计学意义(P<0.05).与体外循环组比较,外泌体处理组各个时间点大鼠的Garcia神经功能评分明显降低,凋亡阳性细胞明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05).体外循环组、外泌体处理组中IL-1β、TNF-α、IL-6、S-100β及NSE水平均明显高于假手术组,IL-10水平明显低于假手术组,差异均有统计学意义(P<0.05).外泌体处理组IL-1β、TNF-α、IL-6、S-100β及NSE水平均明显低于体外循环组,IL-10水平明显高于体外循环组,差异均有统计学意义(P<0.05).与假手术比较,体外循环组、外泌体处理组Bcl-2表达水平降低,Bax、Caspase-3表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05).与体外循环组比较,外泌体处理组Bcl-2表达水平升高,Bax、Caspase-3表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05).与假手术组比较,体外循环组、外泌体处理组中CD4+IL-17+T细胞百分比明显升高,CD4+FOXP3+T细胞百分比明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05).与体外循环组比较,外泌体处理组CD4+IL-17+T细胞百分比明显降低,CD4+FOXP3+T细胞百分比明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 内皮祖细胞来源的外泌体能通过调节Th17/Treg细胞的动态平衡,改善体外循环后脑损伤,其机制与抑制IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子的分泌和Caspase-3/Bax/Bcl-2信号通路的活化有关.

关键词：内皮祖细胞、外泌体、体外循环、脑损伤、辅助性T细胞17、调节性T细胞

所属期刊栏目：9

分类号：R651.15(外科学各论)

资助基金：辽宁省自然基金20180551091

在线出版日期：2021-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1-6