以羊膜为载体体外培养大鼠角膜缘干细胞的实验研究

摘要：

目的 比较角膜缘于细胞(LSCs)在不同羊膜上的生长情况,寻求LSCs体外培养的最佳载体.方法 取健康剖宫产孕妇胎盘的羊膜组织,分别制备保留上皮的新鲜羊膜、去除上皮的新鲜羊膜和冷冻羊膜.消化法分离大鼠LSCs后将其按相同浓度分别种植于3种事先准备好的羊膜载体和无载体孔中,分为4组.实验1组:保留上皮的新鲜羊膜组;实验2组:去除上皮的新鲜羊膜组;实验3组:去除上皮的冷冻羊膜组;对照组:无羊膜载体组.4组细胞分别作细胞凋亡检测,p63、PCNA免疫荧光检测,检测阳性细胞计数.结果 培养第3天,3个实验组培养的细胞排列紧密,融合形成单层,其中可见大小不等的团块状集落,细胞大小基本一致,多呈圆球形或卵圆形.对照组培养的细胞排列相对稀疏,基本融合,形成单层,可见散在的、大小不等的桑葚样细胞集落,集落细胞的生长特征及形态特点与实验组相似.实验组的细胞凋亡率均低于对照组,p63阳性率和PCNA阳性率均高于对照组(P＜0.01),尤以实验1组变化最为明显(P＜0.01).结论 羊膜载体有利于体外培养大鼠LSCs的扩增,保留上皮的新鲜羊膜能更好地维持体外培养LSCs的特性,是体外角膜缘干细胞培养的理想载体.

关键词：角膜缘、干细胞、羊膜、染色与标记、角膜、细胞凋亡、p63、PCNA

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分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：贵州省优秀科技教育人才省长专项资金项目黔省专合字[2012]41号;贵州省科技厅-贵阳医学院联合基金黔科合LG字[2012]026号

在线出版日期：2016-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：3233-3236,3240