人TLR1胞外段的克隆及测序分析

摘要：

目的 构建人Toll样受体1(TLR1)胞外段原核表达质粒.方法 采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从人外周血单个核细胞(PBMC)mRNA中扩增人 TLR1胞外区cDNA;将扩增的目的 基因与原核表达载体pET30a(+)质粒经NcoⅠ和NotⅠ双酶切后连接,转化E.coli BL21(DE3),筛选转化子,菌落PCR及测序验证克隆序列的正确性.结果 测序结果表明,成功构建pET30a(+)-TLR1胞外区基因重组质粒,并转化感受态 E.coli BL21(DE3).结论 TLR1胞外段在大肠杆菌BL21中正确克隆,为TLR1信号通路的进一步研究打下了基础.

关键词：Toll样受体1、pET30a(+)、逆转录-聚合酶链式反应、克隆

所属期刊栏目：39

分类号：R392.32;R364.5

资助基金：四川省教育厅青年基金资助项目07ZB036;四川省卫生厅科研基金资助项目90203,80164;泸州市科技局、泸州市医学院课题资助

在线出版日期：2010-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：2251-2252,2255