hsa-miR-214-5p通过下调PAK4对子宫颈癌HeLa细胞活力和凋亡的调控作用
目的:探究微小RNA-214-5p(micro RNA-214-5p、miR-214-5p)对宫颈癌HeLa细胞生长和凋亡的作用及机制.方法:将细胞分为HeLa组、mimic-scramble组、miR-214 mimic组和miR-214 inhibitor组,用miR-214 mimic和miR-214 inhibitor转染细胞,qRT-PCR检测miR-214和p21活化激酶4(P21-activated kinases 4,PAK4)的表达;生物信息学方法预测miR-214-5p与PAK4的关系,荧光素酶报告实验验证miR-214-5p与PAK4的关系;用pcDNA-PAK4(pc-PAK4)、miR-214 mimic和miR-214 inhibitor转染细胞,Western blot检测PAK4的表达;CCK-8检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡.结果:miR-214mimic组miR-214-5p mRNA的表达水平(46.02±5.23)较HeLa组(1.00±0.01)明显升高(LSD-t =31.423,P=0.000),miR-214mimic组PAK4蛋白的表达水平(0.08±0.04)较HeLa组(0.26±0.05)明显降低(LSD-t=4.296,P=0.002);miR-214 inhibitor组miR-214-5p mRNA的表达水平(0.41±0.05)较HeLa组(1.00±0.01)明显降低(LSD-t=18.726,P=0.000),miR-214 inhibitor组PAK4蛋白的表达水平(0.58±0.05)较HeLa组(0.26±0.05)明显升高(LSD-t=5.061,P=0.001);miR-214-5p与PAK4可靶向结合.miR-214 mimic组细胞生长速度(3.50±0.45)较HeLa组(5.02±0.35)明显降低(tD=8.644,P=0.000),miR-214mimic组细胞凋亡率[(11.42±0.71)%]较HeLa组[(2.61±0.63)%]明显升高(LSD-t=4.032,P=0.003);miR-214 inhibitor组细胞生长速度(5.89±0.32)较HeLa组(5.02±0.35)明显升高(LSD-t=7.863,P=0.000),miR-214 inhibitor组细胞凋亡率[(0.53±0.42)%]较HeLa组[(2.61±0.63)%]明显降低(LSD-t=4.221,P=0.002);共转染pc-PAK4能逆转miR-214 mimic对细胞活力和细胞凋亡的调控作用.结论:miR-214-5p能通过靶向下调PAK4抑制宫颈癌HeLa细胞活力并诱导细胞凋亡.
宫颈癌、miR-214-5p、PAK4、细胞活力、细胞凋亡
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R737.33(肿瘤学)
科技发展基金132102310388
2020-07-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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