顺铂通过CREB1诱导乙肝病毒再激活的实验研究
目的:探索顺铂诱导乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)再激活的机制.方法:将稳定表达HBV的肝癌细胞系Hep-AD38分为2组,即磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)对照组及顺铂(Cisplatin)处理组,分别检测cAMP应答元件结合蛋白质-1 (cAMP responsive element binding protein 1,CREB1)、乙肝病毒蛋白表达(·HBsAg、HBcAg)及病毒复制水平(HBVDNA、HBV mRNA);同样在成功构建稳定敲低CREB1 (shCREB1)的HepAD38细胞中,同正常表达HBV的肝癌细胞系Hep-AD38进行对照,检测经顺铂处理后的HBV复制水平(HBV DNA、HBV mRNA)及蛋白表达水平(HBsAg、HBcAg).结果:稳定表达HBV的肝癌细胞系HepAD38中,Western blot检测显示,与PBS对照组相比,Cisplatin处理组中CREB1相对表达量为1.355±0.049(P=0.010);HBsAg蛋白相对表达量为1.679±0.060(P=0.003);HBcAg蛋白相对表达量为1.488±0.047(P=0.005).qRT-PCR结果显示经顺铂处理后,HBV DNA绝对表达量为249.600±54.400(P=0.006);HBV mRNA相对表达量为3.084±0.256(P=0.000);以上结果表明在HepAD38细胞中乙肝病毒蛋白表达水平以及病毒复制水平较PBS对照组明显上调,均具有统计学差异;与此同时,选择转入shCREB1质粒的HepAD38细胞,即shCREB1细胞,以及转入对照质粒且能正常表达CREB1的Hep-AD38细胞,即shControl细胞,2种细胞组内均设置PBS对照组和Cisplatin处理组,分别检测乙肝病毒蛋白表达以及病毒复制水平.qRT-PCR结果显示,HBV DNA在shControl细胞的Cisplatin处理组相对表达量为518.300±3.458;而在shCREB1细胞的Cisplatin处理组相对表达量为265.300±3.125 (P=0.000);HBV mRNA在shControl细胞的Cisplatin处理组相对表达量为2.713±0.318;而在shCREB1细胞的Cisplatin处理组相对表达量为1.263±0.056(P=0.000).Western blot分析显示shControl细胞的Cisplatin处理组中的HBsAg、HBcAg相对表达量分别为1.254±0.001、2.238±0.041;而在shCREB1细胞的Cisplatin处理组中的HBsAg、HBcAg相对表达量分别为1.121±0.036(P=0.021)、1.681±0.015(P=0.000).结论:顺铂可以通过CREB1促进乙肝病毒复制水平以及蛋白表达水平上调.
cAMP应答元件结合蛋白质-1、乙肝病毒、HepAD38、顺铂
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R512.6+2(传染病)
国家自然科学基金;国家自然科学基金;重庆市科委基础与前沿重点资助项目;创新团队建设项目;重庆市科技领军人才支持计划资助项目
2019-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
1409-1415
