肝癌细胞Huh7与SMMC-7721抗ROS能力对比与机制初步研究

摘要：

目的:比较Huh7、SMMC-7721细胞系抵抗外源性活性氧类(reactive oxygen species,ROS)物质能力的不同,并初步探究肝癌细胞抗ROS的机制.方法:不同浓度的H2O2处理Huh7和SMMC-7721细胞后,比较两者凋亡、坏死的差异,检测细胞内ROS、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)含量及细胞活性、肿瘤干性分子、ROS清除酶基因和DNA修复酶基因的表达变化.结果:同浓度H2O2处理后,SMMC-7721细胞凋亡和坏死数目多于Huh7细胞,其细胞活性明显低于Huh7细胞,在1μmol/mL H2O2浓度组,计数1 500个细胞内SMMC-7721与Huh7细胞凋亡与坏死数目分别为(841.7±78.7)个、(169.7±76.1)个(t=10.638,P=0.000);SMMC-7721与Huh7细胞活性分别为(0.21±0.02)、(0.74±0.14)(t=6.478,P=0.022).肝癌细胞内ROS的水平随H2O2浓度增加呈升高趋势,但Huh7细胞内明显低于SMMC-7721细胞,在1 μmol/mL H2O2浓度组,SMMC-7721与Huh7细胞细胞内ROS水平分别为(128 793±1 158)、(103 455±1 665)(t=21.639,P=O.000);Huh7细胞比SMMC-7721细胞有更高含量的GSH、SOD,并且在H2O2处理后GSH、SOD下降趋势缓于SMMC-7721细胞,在1 μmol/mL H2O2浓度组,SMMC-7721与Huh7细胞内GSH含量分别为(32.85±4.47) mg/g prot、(106.60-6.83) mg/gprot (t=15.655,P=0.000),SMMC-7721与Huh7细胞内SOD含量分别为(19.22±2.93) U/mg prot、(23.57 ±4.85) U/mg prot(t=1.332,P=0.254);整体上肝癌细胞内GSH、SOD的变化早于细胞内ROS和细胞活性的变化;Western blot提示Huh7细胞比SMMC-7721细胞高表达肿瘤干性分子CD133、Bmi-1、ROS清除酶基因SOD2和DNA修复基因Rad51.结论:Huh7比SMMC-7721有更强的抗ROS能力,相对高表达CD133、Bmi-1、SOD2及Rad51,这些分子可能参与了肝癌细胞抗ROS的过程,且可能通过细胞内GSH、SOD直接发挥作用.

关键词：肝癌、活性氧类物质、肿瘤干性分子、DNA修复基因、ROS清除基因

所属期刊栏目：42

分类号：R735.7(肿瘤学)

在线出版日期：2017-08-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：838-844