FSHβ在骨形态蛋白9诱导小鼠胚胎成纤维细胞成骨分化中的作用研究
目的:探讨卵泡刺激素β亚基(follicle-stimulating hormone β,FSHβ)对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)成骨分化中的作用.方法:采用AdEasy系统构建表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)、FSHβ和BMP9的重组腺病毒(Ad-GFP、Ad-FSHβ和Ad-BMP9),实验分组为:Ad-GFP组、Ad-BMP9组、Ad-FSHβ组和Ad-BMP9+Ad-FSHβ组.运用化学发光定量和组织化学染色法分别检测各组3、5、7d碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性;Western blot检测成骨分化早期转录因子(Runx2和DLX5)的蛋白表达水平;RT-PCR检测成骨分化晚期指标骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的mRNA表达水平;茜素红染色检测钙盐沉积;流式细胞技术检测各实验组细胞的周期分布.结果:在MEFs中,过表达FSHβ能明显促进BMP9诱导MEFs骨化过程中第3天(6 874.67±224.93 vs.11 935.67±568.76,P=0.000)、第5天(43 434.67±2 047.57 vs.98 913.33±4 606.26,P=0.000)、第7天(38 198.00±2 376.43 vs.78 534.67±2 114.56,P=0.000)的ALP活性,转录因子Runx2(1.171±0.105 vs.1.350±0.053,P=0.026)、DLX5 (1.382±0.123 vs.1.738±0.286,P=0.001)和晚期成骨指标OCN(1.300±0.045 vs.1.471 ±0.046,P=0.002)、OPN(1.300±0.084 vs.1.479±0.038,P=0.016)的表达水平,以及钙盐沉积.此外,FSHβ和(或)BMP9对MEFs细胞周期没有明显影响(G1期:F=0.226,P=0.876;G2期:F=0.147,P=0.929;S期:F=0.027,P=0.994).结论:在不影响MEFs细胞周期的情况下,FSHβ协同BMP9诱导MEFs成骨分化.
骨形态发生蛋白9、卵泡刺激素β亚基、小鼠胚胎成纤维细胞、成骨分化
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R322.54;R322.71;R329.2(人体形态学)
重庆市科学技术委员会资助项目cstc2012jjA10113
2017-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
327-333
