脂肪干细胞诱导分化为淋巴管内皮细胞信号通路的探究
目的:探讨血管内皮细胞生长因子C (vascular endothelial growth factor C,VEGF-C156s)诱导脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)向淋巴管内皮细胞(lymphatic endothelial cells,LECs)早期分化的调控通路.方法:取人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stem cells,HADSCs)随机分为5组:空白对照组(常规DMEM/F12)、VEGF-C诱导组(含100ng/mL VEGF-C)、VEGF-C联合抑制剂a组(含100 ng/mL VEGF-C+ 5μmol/L的VEGFR3磷酸化酶抑制剂MAZ51)、VEGF-C联合抑制剂b组(含100 ng/mL VEGF-C+10 μg/mL的Anti-Integrinα9功能封闭性抗体Y9A2)、VEGF-C联合抑制剂a+b组,连续培养10d后,Western blot和细胞免疫荧光(IF)检测LECs标志性分子VEGFR3、Integrinα9、LYVE-1的相对表达量;VEGF-C诱导分化后的细胞用Anti-Integrinα9封闭性抗体和MAZ51作用后,Transwell小室检测各组细胞迁移数量的变化.结果:与诱导组相比,分别阻断VEGFR3和Integrinα9通路都会相应减弱LYVE-1的表达(PWetem=0.000,PIF=0.000),且在上述溶度下两抑制剂对LYVE-1的减弱作用无统计学差异(PWetem=0.164,Pn=0.927);而分别阻断任一通路对另一通路的表达量都没有影响(PWetemVEGFR3(BVSD) =0.804,PIF VEGFR3(BVSD) =0.528,PPWetemInteginox9(BVSC) =0.914,PIFInteginox9(BVSC) =0.593).与抑制剂作用之前相比,分别阻断Integrinα9和VEGFR3会使迁移细胞数量相应减少(P=0.000),而同时阻断Integrinα9和VEGFR3会使迁移细胞数量进一步减少(P=-0.000).结论:VEGF-C诱导HADSCs向LECs分化过程中有VEGF-C/VEGFR3和VEGF-C/Integrinα9两条独立信号通路,且Integrinα9和VEGFR3在诱导后的细胞的迁移中均发挥重要作用.
脂肪干细胞、淋巴管内皮细胞、血管内皮生长因子C、人整合素α9、血管内皮生长因子受体3
42
R619.9(外科手术学)
重庆市基础与前沿研究计划项目编号:CSTC2013jcyja10062;重庆市卫生局重点课题资助项目编号:2013-1-014.
2017-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
108-113
