肝癌干细胞的培养、鉴定及CIK对其生长、增殖的影响
目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)对肝癌干细胞(liver cancer stem cells,LCSCs)生长、增殖的影响.方法:用含多种细胞因子(LIF、EGF、bFGF及B27)的无血清培养液(serum-free medium,SFM)诱导SMMC7721人肝癌细胞产生LCSCs,并行LCSCs表面标志CD133、CD90的流式仪(flow cytometry,FCM)检测鉴定与裸鼠致瘤能力观测.以IFN-γ、CD3单克隆抗体(human CD3 monoclonal antibody,hCD3mAb)与IL-2等诱导肝癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)的悬浮细胞生成CIK.用Transwell培养小室将LCSCs与不同密度的CIK在同一培养体系内以该小室膜分隔培养24、48、72 h,采用CCK-8试剂盒检测CIK对LCSCs生长、增殖的影响.以RT-PCR与Western blot分别检测与CIK共培养的LCSCs的增殖细胞核抗原(proliferating cell unclear antigen,PCNA)基因及其编码蛋白的表达变化.结果:FCM检测显示,LCSCs高表达干细胞表面标志分子CD133、CD90.CCK-8法检测表明,与对照比较,与相同密度的CIK共培养的LCSCs,其生长、增殖减慢,48 h开始变得更加明显(P＜0.01).RT-PCR、Western blot检测显示,CIK能明显下调LCSCs的PCNA基因及其编码蛋白的表达.结论:成功诱导培养并鉴定到LCSCs.肝癌患者的CIK可明显抑制LCSCs的生长、增殖与下调其PCNA基因及其编码蛋白的表达.
细胞因子诱导的杀伤细胞、肝癌干细胞、生长、增殖
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R735.7(肿瘤学)
重庆市卫生局医学科研重点项目;重庆市应用开发计划;中国医师协会研究项目
2015-12-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1357-1362
