LIM矿化蛋白-1对间充质干细胞成骨分化影响的实验研究

摘要：

目的:构建LIM矿化蛋白-1(LIM mineralization protein-1,LMP-1)的真核表达质粒,并在兔骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)内表达,研究LM P-1对体外培养BMSCs成骨分化的影响.方法:RT-PCR克隆hLMP-1和骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2),并构建pIRES2-EGFP-LMP-1及pIRES2-EGFP-BMP-2重组质粒.分离培养BMSCs,脂质体介导下将pIRES2-EGFP-LMP-1、pIRES2-EGFP-BMP-2和pIRES2-EGFP质粒转染BMSCs.7d后收集细胞,RT-PCR比较hLMP-1、hBMP-2及I型胶原的表达,检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,免疫组化染色比较骨钙素表达.结果:pIRES2-EGFP-LMP-1和pIRES2-EGFP-BMP-2重组质粒构建成功.重组质粒成功转染BMSCs,RT-PCR证实表达目的基因,hLMP-1和hBMP-2转染组可以明显促进细胞分泌ALP的活性,诱导I型胶原和骨钙素的表达.结论:LMP-1可以促进BMSCs向成骨细胞分化.

关键词：基因治疗、LIM矿化蛋白、组织工程、间充质干细胞、成骨分化

所属期刊栏目：38

分类号：R318.04(医用一般科学)

在线出版日期：2013-04-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：14-19