10.3969/j.issn.0253-3626.2012.10.001
miRNA-451表达质粒的构建及对人A549肺癌细胞侵袭转移及凋亡的影响
目的:探讨miRNA-451对人A549肺癌细胞侵袭转移及凋亡的影响.方法:Hsa-miRNA-451序列通过miRBase数据库查找,根据此序列设计出2条寡核苷酸片段,将目的基因经过退火处理后克隆至真核表达载体pGenesil-1.1质粒中,从而构建成为miRNA-451真核表达载体(pGenesil-1.1-miRNA-451质粒).将pGenesil-1.1-miRN A-451及pGenesil-1.1-control质粒分别转染人A549肺癌细胞,经过G418的筛选,建立pGenesil-1.1-miRNA-451及pGenesil-1.1-control稳定表达的细胞株.流式细胞术分析检测细胞凋亡的情况;Transwell小室检测miRNA-451对细胞侵袭能力的影响;细胞划痕实验检测细胞的迁移情况.结果:经测序证实miRN A-451真核表达质粒构建成功,与未处理的人A549肺癌细胞和稳定表达pGenesil-1.1-control的细胞相比,稳定表达了pGenesil-1-miRNA-451的人A549肺癌细胞的侵袭和迁移能力均明显受到抑制影响,而细胞凋亡无明显变化(P>0.05).结论:miRNA-451对人A549肺癌细胞侵袭转移具有显著的抑制作用,但对细胞凋亡作用不明显.
肺癌、miRNA-451、侵袭、转移、凋亡
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R394.2
国家自然科学基金资助项目30800534;重庆医科大学重点科研资助项目XBZD201001
2012-11-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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