人α1微球蛋白质的克隆、表达、纯化及生物学活性鉴定

摘要：

目的:构建人α1微球蛋白质(α1 -microglobulin,α1M)基因的原核表达质粒,在大肠杆菌中表达α1M蛋白质,纯化并初步鉴定其生物学活性.方法:PCR扩增α1M基因序列,然后转化人大肠杆菌B834中进行表达,利用镍离子亲和层析、离子交换层析及分子筛纯化,ABTS法鉴定其生物学活性.结果:正确构建了α1M的表达质粒,α1M在大肠杆菌B834中为可溶性上清表达,纯化获得了纯度高达95％的α1M蛋白质,分子筛结果显示其在溶液中呈现单体和二聚体2种聚集状态.ABTS法结果显示了重组获得的α1M具有抗氧化活性.结论:α1M能在大肠杆菌B834菌中大量上清表达,且易于纯化,初步鉴定具有抗氧化活性,为下一步进行α1M蛋白质的晶体结构解析和相关功能研究奠定了基础.

关键词：人α1微球蛋白质、表达、纯化、活性鉴定

所属期刊栏目：37

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30970563

在线出版日期：2012-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：445-448