硼替佐米诱导TF-1细胞凋亡及其对SALL4基因表达的影响
目的:探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bortezomib)诱导人红系白血病细胞株TF-1凋亡的作用,及其对Sall4基因表达水平的影响.方法:(1)MTT法检测细胞增殖抑制率.(2)光学显微镜观察细胞的形态学改变.(3)电镜观察超微结构变化.(4)流式细胞仪检测Annexin V-FITC细胞凋亡率.(5)流式细胞仪分析细胞周期.(6)RT-PCR检测Sall4 mRNA的表达水平.结果:(1)硼替佐米呈时间和剂量依赖性抑制TF-1细胞生长,与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).24h和48 h的药物半数抑制浓度(Halfmaximal inhibitory concentration of a substance,IC50)分别为52 nmol/L和27 nmol/L.(2)显微镜下观察细胞皱缩变小,细胞密度明显下降.(3)电镜下观察可见凋亡小体.(4)Annexin V-FITC检测显示随着硼替佐米作用浓度的增加,凋亡率增加,呈剂量依赖关系(P＜0.05).(5)流式细胞仪分析细胞周期,随着硼替佐米作用时间的增加,G2/M期细胞比例逐渐增高,而Go/G1和S期细胞比例则逐渐减少,呈时间依赖关系(P＜0.05).(6)RT-PCR结果示Sall4基因在TF-1细胞上高表达,并随着硼替佐米作用浓度和时间的增加,Sall4 mRNA与β-actin mRNA表达量的积分光密度比值(Integral optical density ratio,V/B)水平下降(P＜0.05).结论:硼替佐米能抑制TF-1细胞增殖,诱导其凋亡,呈时间-剂量依赖关系.Sall4基因在TF-1细胞株上高表达,并随着硼替佐米作用浓度和时间的增加表达水平下降,呈时间-剂量依赖关系.
硼替佐米、TF-1细胞株、细胞凋亡、Sall4基因
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R733.7(肿瘤学)
重庆市卫生局科研资助项目2009-2-21
2011-12-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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