PRP基因绿色荧光蛋白载体构建及其生物学功能初步研究
目的:构建Prolifein related protein(PRP)基因荧光表达载体,并初步探讨其生物学功能.方法:提取小鼠睾丸RNA,RT-PCR扩增PRP基因编码区片段,酶切连入pEGFP-C1载体,构建含有PRP基因片段的绿色荧光表达载体PRP-pEGFP-C1.为了探讨PRP基因功能,PRP-pEGFP-C1经Lipofectamine2000介导转染293FT细胞,MTT实验分析细胞增殖变化,流式细胞仪分析细胞周期分布.结果:质粒PRP-pEGFP-C1经测序验证,证实PRP基因已正确连入pEGFP-C1载体.免疫荧光染色显示PRP 定位于293FT细胞胞浆.MTT结果表明,上调PRP基因引起293FT细胞增殖活性下降,细胞周期分布情况提示G1期细胞增加,S期细胞减少.结论:成功构建PRP-pEGFP-C1荧光表达载体,对其功能研究表明PRP具有抗人293FT细胞增殖,扰乱细胞增殖周期的功能.本研究为PRP在抗人肿瘤方面的研究提供基础.
proliferin related protein、pEGFP-C1、细胞增殖
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R339.2(人体生理学)
国家自然科学基金资助项目30772346、30300422、30901062;重庆市教委资助项目KJ070320
2011-08-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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