小鼠造血干细胞衰老体内模型构建及相关生物学研究
目的:构建小鼠造血干细胞(Homatopoietic stem cell,HSCs)衰老体内模型,并探讨其生物学特点,为延缓HSCs衰老的研究提供平台.方法:免疫磁性分选法分离、纯化雄性鼠的Sca-1+HSCs,流式细胞术鉴定分选纯度,免疫荧光检测Sca-1表达.将1×104个雄性供体鼠Sca-1+HSCs经尾静脉移植给9Gy60Coγ射线全身辐射的雌性受体鼠.PCR检测移植后受体鼠造血细胞Y染色体性别决定(Sex-determining region of Y chromosome,Sry)基因,混合造血祖细胞集落(CFU-Mix)培养,细胞周期分析和SA-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色分析HSCs衰老的生物学特点;计数受体鼠脾集落形成单位(CFU-S)、测定脾脏和胸腺指数,检测受体鼠外周血指标(WBC、RBC、PLT、HCT),评价供体鼠Sca-1+HSCs在受体鼠内衰老和造血功能重建情况.结果:免疫磁性分选法得到的Sca-1+HSCs纯度达87.2%以上.雌性受体鼠的造血细胞均能检测出342 bp的Sry基因.供体鼠Sca-1+HSCs连续2次移植后,形成CFU-Mix集落数量和形成集落的细胞数明显减少;HSCs出现G1期阻滞,G0+G1期细胞比例增高,S期比例下降;SA-β-Gal染色阳性细胞百分率明显增高;脾脏与胸腺指数明显降低;CFU-S形成能力下降;外周血各项指标均有下降.结论:雄性供体Sca-1+HSCs移植能有效重建受体鼠造血功能,连续尾静脉移植2次能初步建立HSCs复制性衰老的体内模型.
造血干细胞、衰老、体内模型、连续移植、生物学研究
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R329.2(人体形态学)
国家自然科学基金资助项目30973818;重庆市科委自然科学基金重点资助项目CSTG、2009BA5038
2011-08-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
385-388
