肝癌细胞中热休克蛋白27相互作用蛋白的分离和鉴定

摘要：

目的:筛选肝癌中热休克蛋白27(Heat shock protein,HSP27)相互作用蛋白.方法:采用免疫共沉淀技术富集肝癌HepG2.2215细胞的HSP27结合蛋白,直接酶解后进行液相色谱-电喷雾离子阱串联质谱分析(LC-ESI-IT MS/MS),通过相应的肽序列标签,(Peptide sequence tags,PST)在SWISS PROT数据库中搜索蛋白质.并用免疫共沉淀和蛋白质印迹分析技术对所鉴定的HSP27相互作用蛋白之一HSP90进行了验证.结果:通过搜索数据库在肝癌细胞系中首次鉴定了12个HSP27结合蛋白,分别是HSP90、HSP70、特异性下调葡萄糖调节蛋白78(GRP-78)、赖氨酰羟化酶(Lysyl hydroxylase)、细胞角蛋白9(Keratin9)、细胞角蛋白10(Keratin 10)和细胞角蛋白1(Keratin 1).所鉴定的7个结合蛋白可以划分为3个作用范畴,分别是:分子伴侣、细胞骨架组织和代谢酶类.结论:HSP27在肝癌组织中参与了相关蛋白的调节,通过与一些多肽或小分子蛋白质的相互作用,而参与调控肿瘤发生发展.

关键词：热休克蛋白27、肝癌、免疫共沉淀、液相色谱-电喷雾离子阱质谱、蛋白质印迹

所属期刊栏目：35

分类号：R735.7(肿瘤学)

在线出版日期：2010-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1221-1223