靶向大鼠gnas基因shRNA真核表达载体的构建与鉴定

摘要：

目的:构建并鉴定靶向大鼠gnas基因的小干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体.方法:根据大鼠gnas基因mRNA序列设计并合成3条shRNA特异性寡核苷酸片段,退火形成双链后克隆进入线性化pGenesil-1.1载体,并进行酶切鉴定和测序,同时构建针对大鼠GAPDH基因的阳性对照质粒和不具有基因同源性的非特异性基因的质粒做阴性对照.结果:经酶切和测序鉴定分析,构建的shRNA已成功插入载体,并且与设计序列完全相符.结论:成功构建了靶向大鼠gnas基因的shRNA真核表达载体,为后续研究Gs a 蛋白在心力衰竭中作用的体内外实验奠定了基础.

关键词：gnas基因、RNA干扰、质粒、心力衰竭

所属期刊栏目：35

分类号：R318.11(医用一般科学)

资助基金：重庆市自然科学基金资助项目CSTC.2007BB5301

在线出版日期：2010-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：10-13