人REGγcDNA克隆及其稳定转染细胞株的建立

摘要：

目的:构建真核表达重组体PcDNA3.1-REGγ的稳定转染细胞株,为进一步深入研究REGγ的功能奠定基础.方法:提取MCF-7细胞的总RNA为模板,通过RT-PCR获取全长REGγcDNA,经限制性内切酶EcoR I、EcoR V酶切后与PcDNA3.1连接构建重组体,冉经内切酶酶切及DNA序列分析鉴定重组体构建正确.以Lipofectamine2000将重组体导入HBL-100细胞,南G418筛选出稳定转染细胞株.结果:经免疫细胞化学和RT-PCR检测并证实稳定转染细胞株中有REGγ的高表达.结论:真核表达重组体PcDNA3.1-REGγ构建成功,并经抗生素筛选获得了稳定高表达REGγ的细胞株,为进一步研究REGγ的功能奠定了基础.

关键词：REGγ、cDNA克隆、转染

所属期刊栏目：34

分类号：R329(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目N0:30670811

在线出版日期：2009-05-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：145-147