热休克小鼠肝癌细胞(H22)源Exosomes的制备及其蛋白组成的初步研究

摘要：

目的:探讨热休克对小鼠肝癌细胞H22分泌的Exosomes产量及蛋白组分的影响,为进一步研究Exosomes在生产和免疫治疗方面的改进提供理论依据.方法:经超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化得到H22细胞分泌的Exosomes和经热休克处理后H22细胞分泌的Exosomes(Heat shocked Exosomes,HS-Exo),透射电镜观察其形态,SDS-PAGE电泳分析其蛋白带组成,Western Blot检测两者所含有的免疫分子情况.结果:在透射电镜下,HS-Exo与Exosomes形态相似,直径约20～90nm的膜性囊泡,结构完整;经热休克处理后小鼠肝癌细胞H22分泌的Exosomes产量增多,且在HS-Exo中表达的热休克蛋白70(HSP70)、热休克同源蛋白70(HSC70)、热休克蛋白60(HSP60)、粘附相关蛋白(ICAM-1)与在Exosomes中的表达相比显著上调(P<0.05).结论:超速分级离心及蔗糖密度梯度离心提取纯化热休克小鼠肝癌细胞H22源的Exosomes的方法具有可行性;HS-Exo中HSP70、HSC70、HSP60、ICAM-1的表达比Exosomes更为丰富,提示HS-Exo可能比Exosomes具有更强的免疫活性.

关键词：Exosomes、肝癌细胞、热休克、肿瘤疫苗

所属期刊栏目：33

分类号：R735.7(肿瘤学)

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：669-672