人蛋白激酶CβⅡ基因开放读码框的克隆及序列分析

摘要：

目的:克隆人蛋白激酶CβⅡ基因(PRKCB1)的开放读码框(Open reading frame,ORF),为其进一步的功能研究提供基础.方法:采用逆转录-巢式PCR法,从人脐静脉内皮细胞株中扩增出含PRKCB1基因ORF全长的片段,所得片段经加"A"处理并插入T载体.经蓝白筛选,用特异引物扩增阳性重组子,得到编码人蛋白激酶C βⅡ(Protein kinase C βⅡ,PKC βⅡ)基因的ORF,并与T载体相连,测序鉴定.结果:通过巢式RT-PCR及T/A克隆获取了PRKCB1基因的ORF,测序结果与GenBank报道序列一致.结论:成功克隆了PRKCB1基因的ORF,在技术路线上可以为某些难克隆的基因提供参考.

关键词：蛋白激酶Cβ基因、聚合酶链反应、T/A克隆、序列分析

所属期刊栏目：33

分类号：R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：国家自然科学基金30570877

在线出版日期：2008-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：18-21