Hsp90α基因RNAi的载体构建研究

摘要：

目的:构建Hsp90α(Heat shock protein 90 alpha)siRNA(Small interfencing RNA)表达载体,为后续的功能研究提供平台.方法:根据Hsp90α基因cDNA序列,设计有小发夹结构的3条寡核苷酸序列到空载体Psuper EGFPI中,转化TOP10菌株,提取质粒,进行酶切鉴定和测序分析.将三条序列和对照序列的质粒分别转染HUK293细胞,提取总RNA,用RT-PCR检测Hsp90 α mRNA的量.结果:经酶切鉴定、电泳证明,含作用序列的重组质粒pSuper-Hsp90 α1,pSuper-Hsp90 α2,及pSuper-Hsp90α3构建是成功的,重组质粒pSuper-Hsp90α 1,pSuper-Hsp90α2测序分析完全正确.用RT-PCR初步证明三条均有干扰效果,pSuper-Hsp90α1最明显.结论:用于Hsp90α RNAi的重组质粒可于体外成功构建,初步确定pSuper-Hsp90α1为最佳作用靶点.

关键词：RNA干扰、热休克蛋白90α亚型

所属期刊栏目：32

分类号：R363(病理学)

在线出版日期：2007-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：597-600