IL-18在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化

摘要：

目的:研究人IL-18成熟蛋白(mhIL-18)在大肠杆菌中的高效的非包涵体表达以及纯化方案.方法:利用PCR方法扩增出 mhIL-18基因,构建融合型表达载体pPTYB1-IL18,转化入大肠杆菌ER2566中,IPTG诱导表达,优化表达条件,超声裂解细胞,采用SDS-PAGE和Western blot分析重组蛋白的表达,亲和层析后用MTT法检测表达mhIL-18的活性.结果:成功构建载体并转化入ER2566后,经IPTG诱导,表达量可占菌体总蛋白的26%以上,其中80%以上的mhIL-18融合蛋白以可溶、有活性的形式存在.亲和层析后的mhIL-18纯度可达95%,具有显著的IL-18的生物学活性.结论:成功的在大肠杆菌中的高效以非包涵体表达mhIL-18,并具有显著的IL-18的生物学活性.

关键词：白介素-18、原核、表达、纯化

所属期刊栏目：31

分类号：R34.33(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：重庆医科大学校科研和教改项目Cx200101

在线出版日期：2006-09-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：524-527,531