毕赤酵母高密度发酵生产重组人内皮细胞抑制素

摘要：

目的:在micro DCU-400发酵罐中探讨表达人血管内皮细胞抑制素(Endostatin)的毕赤酵母(GS115)工程菌株的高密度发酵条件.方法:在发酵过程中,控制溶氧30%以上、温度30℃、pH5.3(生长阶段)或5.0(诱导表达阶段),在无机盐培养基中生长约18～22h后,补加50%甘油继续生长约3～5h,OD600达到450以上,开始进行甘油-甲醇混合物逐渐过渡至甲醇、甲醇浓度由低至高、8h后达到最大诱导浓度(0.08ml/min/L)的诱导方式,维持诱导约60h.离心收集上清液.利用12%聚丙烯酰胺凝胶电泳、酶标检测试剂盒检测表达产物.结果:在诱导表达阶段,OD600最高达到580以上(细胞湿重达到375g/L),表达产量为27.2mg/L,高于摇瓶表达水平(16.3mg/L).结论:在15L发酵罐中成功表达了人血管内皮细胞抑制素,为进一步大批量生产作了准备.

关键词：人血管内皮细胞抑制素、毕赤酵母、高密度发酵

所属期刊栏目：30

分类号：Q554(酶)

在线出版日期：2005-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：46-49