pEGFP-VEGF重组质粒的构建及其在成骨细胞中的表达

摘要：

目的:构建一种含人血管内皮细胞生长因子121(VEGF121)的质粒,以绿色荧光蛋白作为报告基因,观察其在成骨细胞中的表达.方法:从人胎脑文库中,以PCR方法扩增出人VEGF121基因,构建入增强绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1,脂质体法转染成骨细胞,荧光显微镜下观测绿色荧光蛋白的表达;免疫细胞化学及ELISA检测VEGF蛋白的表达.结果:PCR扩增出人VEGF121基因;构建入pEGFP-C1,体外成功转染入成骨细胞,在荧光显微镜下可见强绿色荧光蛋白的表达,免疫细胞化学及ELISA检测到VEGF蛋白的表达.结论:重组质粒pEGFP-VEGF体外转染入成骨细胞后,目的基因能够在细胞有效表达,检测方法简便可靠,为利用转染该种目的基因的成骨细胞进行下一步实验提供了理论支持.

关键词：血管内皮细胞生长因子、质粒构建、基因转染、成骨细胞

所属期刊栏目：30

分类号：R68(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：重庆市教委、重庆市卫生局联合资助项目渝教科[2001]12号文30,01-2-017

在线出版日期：2005-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：27-29,38