碱性磷酸酶直接标记核酸探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒DNA方法的建立及应用

摘要：

目的:建立碱性磷酸酶直接(AlkPhos Direc)标记核酸探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒核酸(DHBV DNA)方法.方法:应用AlkPhos Direc[TM]将碱性磷酸酶直接标记纯化的DHBV DNA全基因制备探针,与目标核酸杂交后加入CDP-Star化学发光试剂,用胶片放射自显影检测DHBV DNA.同时检测了探针的灵敏度和特异性.比较了AlkPhos Direc标记DHBVDNA探针与地高辛标记的DHBV DNA探针检测鸭血清标本100份结果.并用AlkPhos Direc标记探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒核酸的方法考核了活性肽类物质保尔佳(Polyerga)及其8种单体体内抗鸭乙型肝炎病毒作用.结果:探针灵敏度为10pg,无非特异性的结果出现,与地高辛探针比较,用AlkPhos Direct标记探针检测方法的敏感性为100%,特异性为100%,符合率为100%;抗鸭乙型肝炎病毒作用动物实验表明,保尔佳001号单体(CMS001)能使血清中DHBV DNA明显降低(P＜0.05).结论:AlkPhosDirec标记DHBVDNA探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒核酸方法灵敏、特异,与地高辛标记的DHBVDNA探针检测结果完全相符合,可作为药物抗鸭乙型肝炎病毒作用动物实验疗效评价的手段.

关键词：碱性磷酸酶、标记、鸭乙型肝炎病毒、核酸

所属期刊栏目：28

分类号：R521.6(结核病)

资助基金：重庆市教委资助项目000101

在线出版日期：2003-09-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：140-143