抗单链DNA单克隆抗体的制备及应用

摘要：

目的:制备特异性的抗单链DNA单克隆抗体,为建立一种特异、敏感、简便的细胞凋亡检测方法奠定基础.方法:根据烷化剂盐酸氮芥能特异性地修饰小牛胸腺DNA链上的鸟嘌呤(G)而暴露互补链上的胞嘧啶(C)这一特性,将修饰后的小牛胸腺DNA连于甲基化的牛血清白蛋白上制备成完全抗原,免疫BALB/c小鼠获得特异性的抗单链DNA单克隆抗体,并对单抗的类别和特异性进行鉴定;用叠氮钠和抗肿瘤药物VP-16诱导了HL60细胞的坏死和凋亡,利用所制备的抗单链DNA单克隆抗体对其进行检测,并与形态学方法、凝胶电泳法和TUNEL法进行了比较.结果:所制备的抗单链DNA单克隆抗体能与羊抗小鼠IgM发生特异性反应,且能与凋亡细胞特异性结合,而不结合坏死细胞.结论:所制备的单抗为IgM型,利用其能特异地结合单链DNA的特性,可用于检测细胞凋亡,简便、有效地区别细胞凋亡和坏死.

关键词：单克隆抗体、凋亡、单链DNA、氮芥

所属期刊栏目：27

分类号：R393.12

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：145-147