基于Chelex-100和蛋白酶K的蚊虫足样本DNA提取技术

摘要：

”目的”探索出一种蚊虫附肢(如单只足)微量DNA的提取方法,用于蚊虫分子鉴定和基因型研究.”方法”采用Chelex-100溶液和蛋白酶K结合的方法用于单只蚊虫足的微量DNA的提取.基于该方法,将不同方法保存的不同蚊种的足作为实验材料,从中提取蚊虫基因组DNA;以之为模板,扩增核糖体DNA的D2,D3,ITS2区以及线粒体COI和COⅡ基因,并对PCR扩增产物进行测序.”结果”提取到了高质量的基因组DNA,PCR扩增获得了高质量的DNA扩增片段,进一步测序获得了高质量的序列.”结论”该方法价格便宜,操作简单方便,减少了对蚊虫样本的依赖.单只足用于DNA提取不影响对剩下的部分开展形态学等研究,可以作为蚊虫分子生物学研究中微量DNA样本提取的重要方法,也为其他昆虫微量DNA的提取提供理论依据.

关键词：Chelex-100、蛋白酶K、蚊虫、足、DNA提取、PCR扩增

所属期刊栏目：34

分类号：Q175(水生生物学)

资助基金：“两江学者”计划专项经费项目;国家自然科学基金31372265,31672363;国际原子能机构CRP项目18268/R2;国家科技基础性工作专项重点项目2015FY210300;重庆师范大学基金青年项目13XLQ05;重庆市教委科学技术研究项目KJ1600338

在线出版日期：2017-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：26-31